Kohrekudede kasv ja regenereerimine, Inimese kõhrekoeline sidekude

See koosneb tihedast rakkudevahelisest ainest, milles asuvad kondroblastirakud ja kondrotsüüdid. Kahjuks on kogu töö sugurakkudega endiselt eksperimentaalse olemusega ja pole laialt levinud praktikasse jõudnud. STH puuduseks on see, et seda ei saa paikselt manustada, süstides otse kõhrekoe kahjustatud piirkonda, kuna see toimib kaudselt. In order for this approach to be successful, stem cells need to be directed to the target sites, and appropriately guided to proliferate and differentiate into the cell type of interest within the microenvironment provided by biomaterial scaffolds.

Stabiliseeritud või null-kateniini alleele ekspresseerivate retsipienthiirte puhul ei muutunud noorte luu kitsaste rakkude siirdamine täheldatud luumurdude parandamise fenotüüpi, vaatamata kontrollloomade noorenemisele täiendav joonis fig 10d, e. Need andmed kinnitavad, et β-kateniini moduleerimine on vajalik vananenud luumurdude parandamiseks ja osteogeenseks potentsiaaliks. Aeg-ajalt vigastuse ajal β-kateniini vähenemine taastab paranemise Vanade ja noorte luumurdude vahelised vanusest sõltuvad erinevused β-kateniini tasemes olid suurimad varajase murdumise parandamisel joonis 4a.

Dkk-1 on rakuväline valk, mis rakkude sekreteerimisel võib toimida nii kohalikul koekeskkonnal kui ka süsteemselt. Sellisena kasutati vigastuse ajal ravi Dkkga viited 35, 36, 37et hinnata β-kateniini vähenemise mõju varase murdumise parandamise ajal.

Western blot analüüs kinnitas β-kateniini vähenemist Ad-Dkkga töötlemisel, võrreldes Ad-GFP roheline fluorestsentsvalk kontroll joonis 5a. Dkk-1 ekspressioon adenoviiruse poolt piirdus murdude parandamise varajases staadiumis. Western blot analüüs kinnitas ekspressiooni 3 päeva pärast luumurdu ja ekspressiooni kadumist 14 päeva pärast murdumist täiendav joonis Dkkga ravitud kõõmad sisaldasid rohkem luu sisaldust ja vähem fibrootilisi kudesid näidatud nooltega kui kontrollid joonis 5c.

P-kateniini kõrgenenud sisaldus varase luumurdude ajal põhjustab fibroosi kudede sadestumist, samal ajal kui β-kateniini langus varases luumurdude parandamises lubas eellasrakkudel osaleda osteokondraalses rühmas 10, Samuti tõstavad nad võimalust, et osteoporoosi raviks kasutatavad farmakoloogilised ained, mis aktiveerivad β-kateniini, võivad takistada paranemist eakatel patsientidel. Täissuuruses pilt Järeldused Siin näitasime, et vananenud murdude parandamine noorendati β-kateniini moduleerimise kaudu noorte vereringega.

Heterokrooniline parabioos või noorte luuüdi siirdamine oli võimeline uuendama luu parandamist ja osteoblastide diferentseerumist. Olles näidanud β-kateniini modulatsiooni vajalikkust, näitame ka, et β-kateniini vähenemine vanade luumurdude varajastel murdude parandamisel võib uuendada luumurdude parandamise protsessi.

Huvitav on see, et need leiud näitavad põletiku võimalikku rolli luumurdude noorendamisel. Vanuse tõttu põhjustab vigastustest tingitud põletikuline reaktsioon suurenenud fibroosi ja ebatõhusat kudede regenereerimist. Need rakud vastutavad põletikulise reaktsiooni eest vigastuse ajal ja seetõttu põhjustavad need rakud tõenäoliselt noorenenud põletikulist vastust. Mitmed uuringud, sealhulgas meie rühma töö, on kinnitanud sobiva põletikulise reaktsiooni tähtsust tõhusa murdude parandamiseks 37, 38, Meetodid Transgeensed hiired Kõik hiired majutati Toronto Fenogenoomika keskuses ja kõik loomade kasutamise protokollid kiideti heaks Toronto Fenogenoomika Keskuse loomade hoolduskomitee poolt.

Β-kateniini funktsionaalne Kohrekudede kasv ja regenereerimine viis β-galatosidaasi valgu ekspressioonini. Cre-rekombinaasil põhinev ekstsisioon põhjustab β-kateniini valgu 41 stabiliseeritud vormi. Cre-rekombinaasil põhinev ekstsisioon põhjustab selle geeni tühistamise Cre-rekombinaas on piiratud tsütoplasmaga; kuid tamoksifeeniga Mazi liigestest. võimaldab lokaliseeruda tuuma, mis viib sihtgeeni rekombinatsiooni.

Β-kateniini in vivo ajaline moduleerimine P-kateniini ajalise vähenemise korral süstiti 1-päevase pragunemiseelsesse 15 murdmiskohta 2 x pfu Dickkopf-1 cDNA-ga märgistatud adenoviirust C-terminaalse heksa-His märgisega või GFP-d sisaldava adenoviirusega.

Calceini märgistus Aktiivse luukoe sadestamise uurimiseks kasutati fluorokroomi märgistust.

Noorte vereringega kokkupuude noorendab luu paranemist β-kateniini moduleerimise teel

Calcein-roheline 30 mg kg- g soolalahuses manustati peritoneaalse süstimise teel 7 ja 2 päeva enne luumurru saagikoristust. Parabioosi operatsioon Anastomoosi operatsioon viidi läbi 3 või 19 kuu vanuste emaste hiirtega, 4 nädalat enne sääreluu murdu.

Loodud on isokroonilised noored - noored või vanad ja heterokroonilised noored - vanad või vanad - noored paarid. Kõhrekoe metabolismi reguleerimine toimub mehaanilise stressi, närvisüsteemi ja hormonaalsete tegurite mõjul.

1. Kuidas ravida artroosi kodus
2. Geeli voi kreemi osteokondroosiga
3. Kõhre artriidis taastatakse valgu süstimisega - Taastusravi
4. Tooriistad valu liigeste ulevaateid
5. Artriit 5.

Perioodiline surve kõhrekoele ja koormuse nõrgenemine on vees lahustunud toitainete, ainevahetusproduktide ja hormonaalsete-humoraalsete regulaatorite difusiooni püsivad tegurid perikondriumi kapillaaridest, millel on retseptorid ja efektorid, või liigeste sünoviaalvedelikku.

Lisaks on kondrotsüütidel tsüteretseptorid paljude veres ringlevate hormoonide - somatotroopse hormooni STHtüroksiini, insuliini, glükokortikoidide, östrogeenide jt suhtes. Hüpofüüsi hormoonid - somatotropiin ja prolaktiin - stimuleerivad kõhrekoe kasvu, kuid ei mõjuta nende küpsemist.

Kilpnäärmehormoonid - türoksiin ja trijodotüroniin - kiirendavad kondrotsüütide tsüto-diferentseerumist, kuid pärsivad kõhre kasvuprotsesse.

Kilpnäärme ja kõrvalkilpnäärme hormoonidel - kaltsitoniinil ja kõrvalkilpnäärme hormoonidel - on sarnane mõju kõhre ainevahetusele, soodustatakse kasvuprotsesside stimuleerimist, kuid vähemal määral nende küpsemist. Kõhunäärme endokriinsete saarekeste hormoon - insuliin - võimendab skeletogeense mesenhüümi rakkude tsütodiferentseerumist ning postnataalse ontogeneesi staadiumides on sellel kasvu- ja mitogeenne toime.

Neerupealise koore hormoonid - glükokortikoidid ja naissuguhormoon östrogeen - pärsivad kondrotsüütides kollageeni ja glükosaminoglükaanide biosünteesi ning varases sünnitusjärgses perioodis soodustavad nende kõrged kontsentratsioonid kõhrekoe vananemist ja selle hävitavaid muutusi.

Meessuguhormoon - testosteroon - stimuleerib sulfaatumata glükosaminoglükaanide biosünteesi, mis viib kõhrekoe küpsemisprotsesside aeglustumiseni. Üldiselt tuleb märkida, et hormoonid reguleerivad kondrotsüütides spetsiifilisi ainevahetusprotsesse, kuid kondrotsüütide reaktsioonivõime nende toimele sõltub nii keha endokriinse seisundi seisundist norm, hormoonide puudus või liig kui ka kondrotsüütide endi struktuurilisest ja funktsionaalsest seisundist. Kõhrekoe on osa luustikust vt luude liigespindade liigesekõhrekõhrevaheliste ketaste kõhre, kõhrkoe kõhrekatete kujul ja moodustab ka ekstraskeleti kandekonstruktsioone kõri kõhre, hingetoru, bronhid, kõhrkoestiku toru kõhrjas.

Embrüogeneesi käigus moodustub mesenhüümist kõhrekoeline kude vt. Kondrotsüütide eellased on halvasti diferentseerunud prokondroblastid ja kondroblastid.

Need moodustavad histogeneesi ajal suurema osa kõhrekoest, ning seejärel asuvad perikondriumis. Emakasisese Kohrekudede kasv ja regenereerimine varases staadiumis on peaaegu kogu kõrgemate selgroogsete ja inimeste luustik kõhre.

KARTULIKUDE TAASTAMINE LIIDES - Cubit

Kõik kõhrekujulised moodustised, välja arvatud liigesekõhred, on kaetud perikondriumiga, mis koosneb tihedast kiulisest sidekoest, mis on rikas veresoonte poolest.

Perikondrium tagab kõhre kasvu ja toitumise. Lisaks viiakse liigesekõhre toitmine läbi liigeseõõnes oleva sünoviaalvedeliku vt.

Aktiivsel osalusel. Kõhre kude koosneb kondrotsüütidest kõhrerakud ja kõhre maatriksist. Chondrocytes on suured ovaalsed või ümarad rakud, millel on väikesed protsessid. Sõltuvalt küpsusastmest eristatakse mitut tüüpi kondrotsüüte. I tüüpi kondrotsüüt on noor aktiivne rakk, millel on kõrge DNA sünteesi kiirus, millel on võime mitoosiks vt. II ja III tüüpi küpsed kondrotsüüdid sisaldavad tsütoplasmas hästi arenenud endoplasmaatilist retikulumit ja Golgi kompleksi, toodavad ja eritavad aktiivselt kollageeni, glükoproteiine, proteoglükaane.

KARTULIKUDE TAASTAMINE LIIDES - Vigastused

Neid iseloomustab amitootiline jaotuse tüüp vt. Küpses kõhres on ka vesikulaarseid, väga vakuoliseeritud, lagunevaid rakke, mis on oma elutsükli lõpetanud. Kondrotsüüdid paiknevad maatriksi õõnsustes tühimikes eraldatult või rühmades, mis on moodustatud ühe raku jagunemise tagajärjel isogeensed rühmad.

Lünga seinad on tihe kiuline kollageenkarkass nn peritsellulaarne korvmis kaitseb rakke mehaanilise stressi eest. Laku sees on kondrotsüüdid ümbritsetud peene fibrillaarse veerikka põhiainega. Kõhremaatriksis eristatakse kiude ja põhiainet.

Selles artiklis analüüsime, mis on põlve kõhre. Mõelge, millest kõhred on valmistatud ja milline on nende funktsioon.

Kõhremaatriksi kiulised komponendid on II tüüpi kollageen, elastiin, mittekollageenvalgud, glükoproteiinid, proteoglükaanid. Kollageeni makromolekulid moodustavad glükoproteiinide ja proteoglükaanidega suheldes kiulisi struktuure. Põhiaine koosneb proteoglükaanidest ja glükoproteiinidest ega ole amorfne. Paljastas makromolekulide ja nende agregaatide paigutuse ranget orientatsiooni ja korrektsust; orientatsioonivektorid on nii kollageenikiudude suund kui ka kondrotsüütide asukoht. Kõhrekoe iseloomustab selge järjestus rakkude ja maatriksi vastastikuses paigutuses.

Tavaliselt eristatakse territoriaalseid ja piirkondadevahelisi piirkondi.

KARTULIKUDE TAASTAMINE LIIDES

Territoriaalsed alad moodustatakse põhiainega ümbritsetud isogeensete rakurühmade poolt, mis on piiratud ümmarguste kollageenikiudude kiulise raami abil. Territoriaalseid piirkondi esindavad kiudude kimbud põhiaine vahekihtidega, mis on orienteeritud koormuse jaotuse jõujoonte vektori järgi.

Sõltuvalt teatavate kiuliste komponentide ülekaalust ja nende maskeerimise astmest homogeense põhiainega on kombeks eristada hüaliini, kiulist ja elastset kõhre. Kõige sagedamini leitakse kehas hüaliin kõhre. Hüaliinikõhred on liigesekõhre ja rinnaõõnes kõhred, samuti nina, kõri kilpnäärme ja krikoidipikkade luude epifüüsi kõhred, hingetoru ja bronhide kõhred.

Looduslikud hüaliinikõhred on tihedad, elastsed, pärlmuttervalged klaasjadmida seostatakse proteoglükaanide poolest rikka homogeense põhiaine olulise sisaldusega, mille eemaldamisel ilmneb kiuline kollageenkarkass. Kiulist kõhre iseloomustab väljendunud kollageenikiudude kimpude olemasolu, samuti rakkude heterogeensus koos kondrotsüütidega sisaldab see ka fibroblaste. Selgroolülide kettad, pidevad liigesed sünkondroossamuti kõõluste ja sidemete piirkonnad kinnituskohas on ehitatud kiulisest kõhrest.

Kasutades GeNorm'i allpoolse QRT-PCR-i rakendustesse, hinnati võrdlusgeenide stabiilsust optimaalsete cDNA koguste suhtes inimese luuüdist pärinevate mesenhümaalsete ja rasvast saadud tüvirakkude suhtes, mis olid puhtad ja valmistatud diferentseeruma kondrotsüütideks, kaasa arvatud normaalsed inimpäritolu kondrotsüüdid ja lihaskoe rottidel.

Soovitused kõigile luu ja kõhre kudede inseneridele, kes kasutavad qRT-PCR-i, ei ole eeldada, et võrdlusgeeni stabiilsus ja kogus on säilinud rakuliinide või koetüüpide vahel, vaid et iga uue katse puhul alati kindlaks määrata võrdlusgeenide stabiilsus ja normaliseerimiskogus uuesti.

Sissejuhatus Enam kui sajandi möödudes toetuvad kliinilised luu regenereerivad protseduurid endiselt luu pookimise 1, 2, 3-le, et ravida ja regenereerida inimese suurte luudefektide teket. Samamoodi ravitakse osteoartriidi või intensiivse spordi poolt põhjustatud kahjustatud kõhreid, muutes kirurgiliselt invasiivseid protseduure piiratud regeneratiivsete meetoditega, mis ei suuda ravida kriitilisi defekte 4, 5, 6, 7, 8, 9.

Liigesepindu katv kude - Artriit

Kuigi mõnes molekulaarses mehhanismis on saavutatud mõningaid edusamme ja kuidas luu ja kõhre moodustumist saab eksperimentaalselt indutseerida, on probleem kas regenereerivate defektide või kahjustatud osteogeensete või kondrogeense materjali täieliku taaskasutamise probleemiks 10, 11, 12 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, Üks teguritest, mida sageli ei arvestata, on geeniekspressiooni mustrite ja nende järgneva tõlke jälgimiseks kasutatavate analüütiliste meetodite mitmekesisus, mis on otsustavad tegurid realistlike mehhaaniliste molekulaarsete arusaamade loomisel, kuidas regeneratiivsed protsessid toimivad ja kuidas neid moduleerida.

Reaalajas pöördtranskriptsiooni kvantitatiivne polümeraasi ahelreaktsioon qRT-PCR on muutunud juhtivaks analüütiliseks tehnikaks ning see on ökonoomne, lihtne ja väga tõhus meetod geeni transkriptsiooni jälgimiseks, mis on viimase kahe aastakümne jooksul teinud märkimisväärseid edusamme. Kvantitatiivne reaalajaline PCR jääb parimaks alternatiiviks uutele tekkivatele tehnikatele, nagu digitaalne tilk PCR ja järgmise põlvkonna järjestus, mis on sageli väga kulukad.

Kuigi mõned luu- ja kõhre-uuringurühmad on juba kasutanud Bustin et al. Täpse ja reprodutseeritava geeniekspressiooni andmete puudumine võib olla üks tegureid, mis soodustavad in vitro puudulikku või nõrka translateeritust kliinilisse konteksti, takistades seeläbi regeneratiivset ravi asendamast praegu luu ja kõhre raviks kasutatavaid kuldstandardeid. Inimese rasvaväliste mesenhümaalsete tüvirakkude hADSC ja inimese kondrotsüütide puhul vähenes kõigi kaheksa kandidaat-referentsgeeni keskmine künnistsükkel, kuna cDNA kogus suurenes.

Liigesepindu katv kude

Täissuuruses tabel Võrdlusgeenide ekspressiooni stabiilsus ja optimaalne arv Rakke hinnati eraldi, kombineeritult ühe raku või koetüübi jaoks, diferentseerituna või diferentseerimata või kõikide rakkude ja koetüüpide kogu kombinatsioonina. Erinevad analüüsid on erinevad hüpoteetilised eksperimentaalsed stsenaariumid, mis võiksid tekkida uuringu käigus. Seoses normaliseerimiseks vajalike võrdlusgeenide optimaalse arvuga näitasid tulemused, et 2 kuni 3 võrdlusgeeni oli piisav nii ühe kui ka kombineeritud GeNorm analüüsi komplekti jaoks joonis 1A2 — C2.

Nende võrdlusgeenide järjekord stabiilsuse skaalal muutus. Täissuuruses pilt Normaalsed ja töödeldud apoptootilised kondrotsüüdid Töötlemata või apoptootilise ravi ATDC5 inimese kondrotsüüdid näitavad, et qRT-PCR-i normaliseerimiseks kasutatavate võrdlusgeenide optimaalne arv pärast GeNorm-i hindamist on töötlemata kondrotsüütide puhul 5 kuni 6, töödeldud kondrotsüütide rühma puhul 6 kuni 7 ja 4 kuni 5, kui nii töötlemata kui ka apoptootilised kondrotsüütide rühmad on ühendatud joonis 3A2 — C2.

Võrdlusgeeni ekspressiooni stabiilsusjärjestus erinevate rühmade vahel jäi samaks joonis fig 3A1-C1.

Geneetilisel tasandil osalemine pole alati lihtne. HDI taseme tõstmine ei sobi kõigile, eriti kui onkoloogia perekonnas on esinenud. Kuid kõik saavad proovida muuta oma sisemist ainevahetust ja vereringet. Kogu raskus on selles, et kõhrel pole veresooni: Intervertebral ketta kõhre toitub selgroolülide kehade anumate kaudu.

Keskmine ekspressiooni stabiilsus A1, B1, C1 ja optimaalne arv võrdlusgeene normaliseerimiseks A2, B2, C2 qRT-PCR testide jaoks, kasutades GeNorm algoritmi, A normaalsete inimese kondrotsüütide hChondrocytes ja B puhul hChondrocytes, mis läbivad apoptoosi või C nii normaalsed kui ka apoptootilised kondrotsüütide rakuliinid.

C GeNorm'i tulemused kõigi töötlemata ja töödeldud rakuliinide ja tüüpide vahel. Täissuuruses pilt Rattus novericus rectus kõhu lihaste normaalne ja osteogeenne Töötlemata lihaskoe, sealhulgas lihaskoe, mida oli stimuleeritud osteogeenseks diferentseerumiseks, kasutades osteogeenset keskkonda in vitro kultuurisüsteemis, analüüsiti eraldi ja kombineeriti, kasutades GeNorm'i hinnangut.

Tulemused näitavad, et referentsstabiilsus muutub märkimisväärselt töötlemata, töödeldud ja kombineeritud katserühmade hindamisel joonis 5A1 — C1kus võrdlusgeeni järjestus on seotud stabiilsuskõveraga. Normaliseerimiseks vajalike võrdlusgeenide optimaalse arvu osas näitavad tulemused, et 2 kuni 3 on vaja ravimata roti lihasrühmas 3 kuni 4 osteogeensete rottide lihastes või nii töötlemata kui ka ravirühmades joonis 5A2 — C2.

Töötlemata roti lihaste üldine geeniekspressiooni stabiilsus oli kõrgeim, osteogeensete rottide lihaste järjestus oli viimane järjestikuste rühmade seas teine. Täissuuruses pilt Arutelu Käesoleva uuringu tulemused näitavad selgelt, et paljudes suhtelistes qRT-PCR rakendustes kasutatavaid võrdlusgeene ei kasutata sobimatult, kuna majapidamisgeeni ekspressioon muutub raku- ja koetüüpide vahel, kaasa arvatud see, kuidas neid kasutatakse mitmesugustes katsetingimustes.

Tootel on kumulatiivne toime.

Soovitused geeniekspressiooni andmete täpsuse parandamiseks luu- ja kõhre kudede inseneris

See mõjutab samaaegselt kõiki liigest ja mitte lokaalselt ühte. Lisaks paraneb samaaegselt hüaluroonhappe sisaldus kõikides kudedes. Ja see mõjutab nägemisteravust, naha turgorit, lihastoonust ja painduvust. See on keha vananemisprotsessi pärssimine. Juba poole aasta pärast toimub liigese kõhrekoe regeneratsioon, järgides kolme olulist tingimust: 1. Kudede püsiv detoks 2. Liikumine ja energia Sel juhul taastatakse kõhre looduslikult.!

Näete 7-aastasel lapsel peaaegu täielikult hävinud liigest. Vanemad keeldusid endoproteesimisest ja kohustusid taastada liigese kõhrekoe iseseisvalt: kohandasid toitumist, rakendasid toidulisandeid vitamiine, mineraale, aminohappeid jne. Ja aasta pärast taastati kõhrekoe täielikult. Isegi pärast ühte BiLuroni võtmist on liikumisraskustega inimestel liigeste hüdratsiooni tunne ja Teravad reie valud. Kõhre parandavaid süste pole vaja teha.

Nende hulgas on neid, kus inimesed kirjutavad "mõttetu raha raiskamise kohta". Nagu see, et toode ei tööta ja tulemust nad ka ei saanud. Teadlaste arvates on see areng artriidiravis lootustandv.

Juhtiv teadlane hoiatas, et protsess saab juba mitu aastat enne kliinilisteks uuringuteks inimestel valmis. Tüvirakke kasutatakse ka artriitiliste puusade jaoks uue kõhre kasvatamiseks, kasutades selleks tehnikat, mida arendatakse Koostöös Cytex Therapeuticsiga on nende teadlaste lootus, et sellest saab puusaliigese proteesimise operatsiooni alternatiiv. See meetod näitab alla aastaste jaoks kõige lootustandvamaid.